Trabajo Practico sangre



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Trabajo Practico SANGRE
La sangre es un tejido compuesto por un plasma líquido en el que se encuentran en suspensión tres tipos de elementos formes, eritrocitos, leucocitos y trombocitos. Participa en gran parte de las actividades funcionales del organismo y mantiene un ambiente constante a partir de su circulación permanente, posibilitando a su vez un medio de intercambio entre los diversos tejidos.

Está compuesta por dos fases: el plasma y los elementos formes.

El plasma es un líquido color ámbar claro que contiene sustancias disueltas como proteínas, hidratos de carbono, lípidos, electrolitos, pigmentos, hormonas, etc.

Muchas propiedades físicas y químicas del plasma son influidas por las proteínas plasmáticas, que determinan la densidad del plasma (1,028), así como su viscosidad. La albúmina y las globulinas determinan de manera sustancial la presión coloidosmótica del plasma. Las globulinas y el fibrinógeno determinan la estabilidad de la suspensión de eritrocitos en plasma. El fibrinógeno es esencial para la coagulación, etc.


Componentes formes:

Son elementos celulares o subcelulares que proporcionan gran parte de las propiedades funcionales de la sangre.

Hematíes o eritrocitos: Son discos bicóncavos anucleares que se forman en la medula ósea. Su función principal es el transporte de oxigeno y dióxido de carbono. Pueden soportar grandes cambios morfológicos sin variar su volumen.

Leucocitos: están constituidos por varios tipos celulares cuya función es proteger al organismo de todo tipo de infecciones.

Normalmente la proporción de los mismos es constante y responde a la denominada formula leucocitaria:



Neutrófilos 62%

Granulocitos Basófilos 0.4%

Eosinófilos 2.3%

Monocitos 5.3%


Linfocitos 30%


Plaquetas: Son pequeños cuerpos incoloros subcelulares de un diámetro de 3 µm y con una longevidad de 7 a 10 días. Son de gran importancia en hemostasia. Contribuyen a la integridad del endotelio, se transforman para la formación de un tapón plaquetario, establecen una matriz para que la coagulación sea más eficaz y se retraen para aproximar los bordes de las heridas.


Para una persona de 70 kg:

  • El volumen sanguíneo es de 5.000ml para el hombre y de 4.500 para la mujer.

  • El volumen plasmático total es de 3.200ml

  • El volumen eritrocitario total es de 1.800ml

  • En los varones jóvenes el número normal de eritrocitos es de 5.200.000 (± 300.000), mientras que en las mujeres es de unos 4.700.000 (± 300.000).

  • La densidad normal de la sangre 1,088

  • Densidad del plasma: 1,028

  • El contenido de hemoglobina normal es de aproximadamente 35gr./ 100ml Valor al que se lo denomina normocrómico. Por encima de este valor se denomina hipercrómico y por debajo hipocrómico.

Grupos Sanguíneos:

Existen en los seres humanos incompatibilidad entre sangres de distintos individuos, debidas a variaciones en la actividad antigénica en plasma y eritrocitos. De acuerdo a la actividad antigénica se ha clasificado la sangre en los tipos A, B, O y AB. Dicha incompatibilidad se encuentra determinada genéticamente.

En las globulinas del plasma existen anticuerpos antiA y antiB. Cuando en la sangre existe uno de estos anticuerpos, el antagonista falta. Al mezclar eritrocitos exógenos con sus anticuerpos antagonistas, se produce la aglutinación de los eritrocitos del dador.

La sangre tipo O no tiene ningún antígeno, pero sí los anticuerpos a y b.

La sangre tipo A contiene el anticuerpo b.

La sangre tipo B contiene el anticuerpo a.

La sangre tipo AB contiene los antígenos A y B y ningún anticuerpo.

La forma de determinar el grupo sanguíneo de un individuo se basa en reacciones antígeno - anticuerpo.

Existen preparaciones comerciales de anticuerpos para los antígenos sanguíneos con las que se realizan las determinaciones

La muestra a analizar se divide en 3 submuestras sobre una plaqueta.

A la primera submuestra se le coloca el preparado de anticuerpos que reacciona contra el antígeno A, a la segunda el que reacciona contra el antígeno B y a la tercera el del antígeno RH.

Se mezcla cada preparación por separado cuidando que no exista contaminación entre las mismas y se esperan de 2 a 5 minutos.

Los preparados que presenten aglutinación serán considerados como resultados positivos y los que permanezcan sin cambio como negativos.

A continuación se presentan 4 ejemplos gráficos.


Resultados de las pruebas de laboratorio


PLAQUETA RESULTADO


Grupo A

Factor RH negativo



Grupo B

Factor RH positivo





Grupo O

Factor RH negativo





Grupo B

Factor RH negativo


Desarrollo del Trabajo Práctico:

1- Determinación de grupos sanguíneos

Se procederá a extraer muestras de sangre por punción en la yema del dedo índice o pulgar atendiendo a las medidas de bioseguridad necesarias.

Cada muestra será dividida en tres sub-muestras sobre portaobjetos individuales.

A la muestra 1 se le aplicará el antisuero a. A la muestra 2 se le aplicará el antisuero b y a la última se le aplicará antisuero rh.

Se homogeneizarán con palillos individuales a fin de evitar la contaminación con otras muestras.

Pasados 5 minutos se procederá a observar cada muestra e interpretar el resultado. Los mismos serán volcados en la siguiente planilla.





MUESTRA

Anti a

Anti b

Resultado

















































Hematocrito:

Se denomina hematocrito o volumen globular a la proporción de eritrocitos que hay en 100ml de sangre.

El valor del hematocrito depende de dos factores: el numero (cantidad) de eritrocitos y el volumen de cada eritrocito.

Desarrollo del experimento:

Se procederá a extraer una muestra de sangre de 10 ml. Se dividirá la muestra en cuatro tubos de ensayo previamente heparinizados. Uno de los tubos será centrifugado durante 20 minutos a 1500 rpm. A fin de separar plasma de eritrocitos. Se procederá a constituir las siguientes muestras:

Tubo 1: Sangre normal heparinizada

Tubo 2: A la sangre normal de este tubo se le agregará el suero obtenido, constituyendo una muestra de sangre hemodiluída.

Tubo 3: A la sangre normal de este tubo se le agregarán los eritrocitos obtenidos, constituyendo una muestra de sangre hemoconcentrada.

Para cada una de estas muestras se procederá de la misma forma:



  • Cargar el tubo de hematocrito con sangre hasta completar los 100ml.

  • Centrifugar durante 20 minutos a 1500 rpm.

  • Leer el valor del hematocrito en la escala del tubo. La altura de la columna roja indica el volumen globular.

Los resultados de la observación se volcaran en la siguiente grilla:


MUESTRA

Valor

Sangre normal




Sangre hemodiluída




Sangre hemoconcentrada






Valores normales de hematocrito: 47 ± 7 % en el hombre


42 ± 5 % en la mujer
Eritrosedimentación:

La variación en velocidad de la caída de los eritrocitos se debe a que son capaces de unirse formando conglomerados que adquieren el aspecto de “pilas de monedas”. Estos conglomerados se comportan como cuerpos de mayor peso y tamaño. La conformación de estos conglomerados se modifica por la presencia de ciertos factores plasmáticos asociados a globulinas y fibrinógenos. La fluidez del plasma es otro factor asociado a este proceso.

Desarrollo del experimento:

Utilizando las muestras preparadas en la experiencia anterior, se procederá para cada una de ellas de la siguiente forma:



  • Cargar las pipetas con sangre hasta completar y tapar con el dedo el extremo superior.

  • Colocar las pipetas en la grilla de sostén asegurando el extremo inferior de la pipeta a la base de goma.

  • Registrar a los 30, 60 y 90 minutos los milímetros de plasma libre de eritrocitos en cada pipeta

  • Completar el siguiente cuadro




MUESTRA

30 minutos

60 minutos

90 minutos

Sangre normal










Sangre hemodiluída










Sangre hemoconcentrada











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