Fundamento: El adn se encuentra en el núcleo de las células eucarióticas donde aparece unido a proteínas formando la cromatina



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PRÁCTICAS DE LABORATORIO

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EXTRACCIÓN DEL ADN FUNDAMENTO: El ADN se encuentra en el núcleo de las células eucarióticas donde aparece unido a proteínas formando la cromatina. Es la molécula portadora de la información genética, donde se encuentra la clave de los caracteres hereditarios que se traspasan de la célula madre a las células hijas y en definitiva de padres a hijos.

Cada persona tiene su propia información genética, heredada del padre y de la madre. Y por tanto, el ADN de cada persona es único y constituye sus señas moleculares de identidad.

Sin embargo, la estructura de la molécula del ADN es igual en todos los seres vivos y consta de una doble cadena de nucleótidos de A (Adenina), T (Timina), C (Citosina) y G (Guanina) enrollados en hélice. La estructura del ADN, llamada la doble hélice, fue descubierta por Watson y Crick en 1953 y abrió el camino de la Genética Molecular.

Con esta técnica, tras romper o lisar con detergentes la pared celular, la membrana plasmática y la envuelta nuclear, y mediante un tratamiento con proteasas, se consigue dejar libre el ADN que se separará del resto de los componentes celulares al dejarlo precipitar en alcohol

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OBJETIVOS

 Repasar la composición química y la estructura de la doble hélice de ADN

 Aplicar el procedimiento de trabajo

 Realizar técnicas de laboratorio sencillas para extraer las moléculas de ADN.

Conocer la estructura molecular del ADN.

Construir la doble hélice del ADN a partir de modelos moleculares.

 Trabajar de forma correcta, y siguiendo todas las normas básicas, durante toda la práctica.

Cumplimentar el guión de trabajo de la práctica



MATERIALES

 Zumo de piña o un limón

 Detergente líquido de lavavajillas

 Agua


 6 g de NaCl o sal común

 200ml de alcohol etílico al 90% muy frío

 Guisantes (si estaban congelados hay que traerlos descongelados)

Vaso de precipitados, tubos de ensayo, colador o papel de filtro, embudo, palillos, mortero, varillas de vidrio, frasco pequeño de cristal (con tapadera)

(en negrilla lo aporta el laboratorio). El resto lo traen los alumnos (individualmente)

NORMAS Y PRECAUCIONES

 Un laboratorio se caracteriza por su orden y limpieza. Deja el laboratorio ordenado, limpio y todos los instrumentos empleados lavados y guardados.

 “Cuando hables, procura que tus palabras sean mejores que el silencio”. Proverbio hindú

 Recuerda que NO estamos jugando a

 NO TIRAR NADA A LAS PILAS.

METODOLOGÍA. PROCEDIMIENTO.

1. Coger unos cuantos guisantes y colocarlos en el mortero (aproximadamente 200ml).

2. A continuación, echar agua. El volumen de agua debe ser más o menos el doble del volumen de guisantes que hayas puesto (aproximadamente 400 ml). Añadir una

pizquita de sal.

3. Triturar la mezcla de tal forma que quede lo más fina posible.

4. Añade detergente líquido a esta mezcla. La cantidad de detergente debe ser más o menos 100 ml.

5. Dejar reposar la muestra unos 10 minutos. Durante este tiempo, el detergente

rompe las membranas celulares y el ADN quedará libre.

6. Colar la mezcla con un colador o con papel de filtro y utilizando el embudo,verter la mezcla en el otro vaso de precipitado.

7. Echa el líquido que has extraído en un tubo de ensayo, aproximadamente, 1/3 del

tubo de ensayo (20 ml) y añade el zumo de piña o de limón (unos 10 ml). Este zumo va a realizar la función de las enzimas proteolíticas que destruyen las proteínas que van unidas al ADN formando la cromatina.

8. Agita suavemente la mezcla. Debes hacerlo muy suavemente para no romper las

hebras del ADN.

9. Inclina un poco el tubo y echa alcohol etílico al 90% lentamente (30 ml), que vaya

escurriendo por la pared del tubo. Añade tanto alcohol como líquido tenías en el

tubo de ensayo.

9. A continuación verás como el ADN, en forma de hilillos de color blanco, comienza a elevarse y sale a la capa de alcohol.

10. Puedes “pescar” el ADN con unos palillos.


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CUESTIONES

 ¿Para qué machacas y trituras los guisantes?


 ¿Qué función cumple el detergente líquido?
 ¿Qué función realiza el zumo de piña?
 Describe el ADN que has extraído de las células de guisante


CONCLUSIONES Y/O OTROS DATOS

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